免费论文摘要：回旋模仿失重前提下成骨细胞系MC3T3-E1的成长状况和基因表白

摘 要本接洽以成骨细胞系MC3T3-E1为接洽东西,经过前线腺癌细胞系pc-3渗透物开辟和运用回旋模仿失重安装模仿失重,树立各别的培植前提,在细胞程度上，从细胞的增殖、分裂和样式变革上面接洽成骨细胞对前线腺癌细胞渗透物刺激的相应和对回旋模仿失重的相应。分子程度上，查看了骨钙素（osteocalcin,ocn），I-型胶原（type-I collagen），骨桥卵白（osteopontin,opn），c-fos和 -tubulin（内部参考消息）那些卵白的mRNA表白，接洽pc-3渗透物和模仿失重两种各别刺激对骨接收和骨产生平稳的调节和控制。重要实质和截止如次：应用普遍细胞株培植本领培植成骨细胞系MC3T3-E1细胞，过程传代扩大与增加充满细胞数目，并经过样式查看、碱性盐酸酶（Alkaline Phosphatase,ALP）表白检验和测定等本领表白细胞具备成骨细胞的典范底栖生物学动作。配制各别比率的含pc-3渗透物的培植液和实足培植液的搀和培植液，搀和培植液中含pc-3渗透物的培植液的比率辨别是25%，50%，75%，以实足培植液培植的细胞为比较，培植细胞三天。细胞从育种到培植瓶三天后，用噻唑蓝（MTT）检验和测定细胞增殖和活性的情景。试验截止表白，与比较组比拟，含渗透物上清液50%组细胞的增殖和活性巩固了12%，含渗透物上清液25%和75%组辨别贬低了3%和15%，含有过量比率pc-3渗透物的培植液激动成骨细胞系MC3T3-E1的增殖和分裂。为创作细胞模仿失重前提，购置了整套NASA回旋细胞培植安装，囊括回旋竖直平台，圆柱型培植腔，转速遏制体例，微载体，胶塞和两通。该安装不妨按照细胞的品种、增殖情景，经过安排转速，供给细胞培植的回旋模仿失重培植前提。整套安装组建简单，经过变换初始介入微载体的数目，不妨察看出细胞较长功夫的增殖情景。该安装取样简单，便于丈量细胞的各项生物化学目标。安排回旋模仿失重安装转速为10r/min模仿微重力效力，在模仿失重前提下培植成骨细胞MC3T3-E1，其余以沟通初始前提在培植瓶中培植MC3T3-E1动作比较组。细胞发端培植后五天，每天用噻唑蓝（MTT）检验和测定细胞增殖的情景，用对硝基酚盐酸脂（PNPP）检验和测定细胞ALP情景。试验截止表白，细胞增殖与分裂上面,模仿失重前提与比较组比拟, 细胞内碱性盐酸酶(ALP)活性和细胞增殖本领均明显缩小 .比较组从第二天到五天细胞增殖变革不大,而细胞的ALP活性巩固,证明每个细胞个别分裂本领在巩固.而回旋组细胞从第一天到五天增殖本领趋于巩固,而分裂本领变革不大,证明个别细胞的分裂本领在模仿微重力的感化下缩小。.安排回旋模仿失重安装转速为10r/min模仿微重力效力，在模仿失重前提下培植成骨细胞系MC3T3-E1，其余以沟通初始前提在培植瓶中培植MC3T3-E1动作比较组。沿用RT-PCR在分子程度上检验和测定骨钙素（osteocalcin,ocn），I-型胶原（type-I collagen），骨桥卵白（osteopontin,opn），c-fos和 -tubulin（内部参考消息）那些卵白的mRNA表白，回旋模仿失重组与比较组比拟,c-fos表白明显巩固,表白细胞所处力学情况爆发变换; ocn，type-I collagen mRNA表白明显缩小 , opn mRNA表白明显巩固 . 模仿失重前提缩小成骨细胞MC3T3-E1成骨关系因子的mRNA表白,进而控制骨产生，巩固破骨关系因子的表白，进而激动骨接收。要害词:微重力, 成骨细胞,增殖,分裂, RT-PCR

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