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目前,化学发光分析研究主要集中于两个方面:一是寻找新的化学发光反应体系以及合成新的化学发光试剂,以扩大化学发光分析的应用范围;二是将已有的化学发光反应体系同新近出现的技术相结合,以提升化学发光分析的应用价值。
鲁米诺是最常用的液相化学发光试剂之一。在碱性介质中,鲁米诺可被许多氧化剂氧化产生化学发光。由于鲁米诺自身与这些氧化剂反应产生了较强的发光信号,方法的背景信号较高,这在一定程度上限制了方法灵敏度的进一步提高。研究发现,在Cu(II)存在条件下,无需外加氧化剂,盐酸二甲双胍、三种巯基化合物及十三种头孢菌素类抗生素与鲁米诺反应均可检测到强的化学发光信号。基于此发现,建立了测定这些物质的流动注射化学发光新方法。
本论文分为两部分:综述和研究报告。
在综述部分,简单介绍了鲁米诺化学发光反应的机理,详细总结了近五年鲁米诺化学发光体系的分析应用进展。在研究报告部分,详细研究了盐酸二甲双胍、三种巯基化合物(半胱氨酸、乙酰半胱氨酸和谷胱甘肽)以及十三种头孢菌素类抗生素(头孢氨苄、头孢羟氨苄、头孢拉定、头孢唑林钠、头孢克洛、头孢呋辛脂、头孢噻肟钠、头孢哌酮钠、头孢曲松钠、头孢他啶、盐酸头孢他美酯、头孢克肟和头孢泊肟)在鲁米诺-Cu(II)体系中的化学发光行为,建立了测定这些物质灵敏的流动注射化学发光新方法,并成功应用于实际样品分析。同时探讨了化学发光反应的机理。研究报告由三部分组成:
一、Luminol-Cu(II)-盐酸二甲双胍化学发光体系的研究
发现了Luminol-Cu(II)-盐酸二甲双胍化学发光体系,仔细优化了实验条件,建立了测定盐酸二甲双胍的流动注射化学发光新方法。在优化的实验条件下,盐酸二甲双胍浓度在1.0´10-9~1.0´10-7 g/mL范围内与化学发光强度呈线性关系。方法的检出限为5´10-10 g/mL盐酸二甲双胍。对浓度为1.0´10-8 g/mL盐酸二甲双胍溶液进行11次平行测定的相对标准偏差为1.1%。该方法已用于药物制剂中盐酸二甲双胍含量的测定。
二、Luminol-Cu(II)化学发光体系测定三种巯基化合物
研究发现,三种巯基化合物(半胱氨酸、乙酰半胱氨酸和谷胱甘肽)均能与鲁米诺在碱性溶液中直接反应产生弱的化学发光,Cu(II)的存在使体系的化学发光强度显著增强。据此,建立了测定这三种巯基化合物的流动注射化学发光新方法。该方法测定半胱氨酸、乙酰半胱氨酸和谷胱甘肽的线性范围分别为4.0´10-9~1.0´10-7 g/mL、7.0´10-10~1.0´10-7 g/mL 和4.0´10-9~1.0´10-6 g/mL;检出限分别为8´10-10 g/mL、2´10-11 g/mL和7´10-10 g/mL。该方法已应用于药物制剂中乙酰半胱氨酸和谷胱甘肽含量的测定。
三、Luminol-Cu(II)化学发光体系测定十三种头孢菌素类抗生素
研究发现,在Cu(II)存在条件下,十三种头孢菌素类抗生素(头孢氨苄、头孢羟氨苄、头孢拉定、头孢唑林钠、头孢克洛、头孢呋辛脂、头孢噻肟钠、头孢哌酮钠、头孢曲松钠、头孢他啶、盐酸头孢他美酯、头孢克肟和头孢泊肟)与鲁米诺在碱性溶液中反应产生强的化学发光信号。基于这一发现,建立测定十三种头孢菌素类抗生素的流动注射化学发光方法。在优化的实验条件下,该方法的检出限分别为3´10-10 g/mL头孢氨苄、3´10-9 g/mL头孢羟氨苄、3´10-10 g/mL头孢拉定、2´10-8 g/mL头孢唑林钠、8´10-10 g/mL头孢克洛、2´10-8 g/mL头孢呋辛脂、5´10-9 g/mL头孢噻肟钠、2´10-8 g/mL头孢哌酮钠、8´10-10 g/mL头孢曲松钠、1´10-9 g/mL头孢他啶、8´10-11 g/mL盐酸头孢他美酯、8´10-10 g/mL头孢克肟和2´10-9 g/mL头孢泊肟。该方法已用于药物制剂中头孢拉定含量的测定。
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