论文摘要：铁皮石斛多糖及其抗凝血作用及DNA保护作用研究

铁皮石斛 (Dendrobium officinale Kimura et Migo)是一种传统的贵重中药材，具有益胃生津，滋阴清热的功效，被2010版《中华人民共和国药典》收录，是石斛中的极品，应用历史悠久，民间又称“救命仙草”、“植物黄金”。研究表明，铁皮石斛主要活性成分有石斛多糖、生物碱等。本研究对铁皮石斛三种不同材料（愈伤组织，试管苗及栽培苗）的多糖含量及多糖的单糖组成和铁皮石斛愈伤组织多糖的抗凝血作用及DNA保护作用进行了研究，为铁皮石斛资源的合理开发利用提供资料。主要研究内容及结果如下：
1. 采用苯酚-浓硫酸法分别测定了铁皮石斛愈伤组织、试管苗及栽培苗三种不同材料的多糖含量，结果表明，铁皮石斛多糖含量差异较大，受不同培养基、不同材料、不同部位、不同种质等因素的影响；愈伤组织中多糖含量低，试管苗中次之，栽培苗中含量较高，多糖含量一般为愈伤组织（3.60±0.66）%，试管苗（4.83±2.72）%，栽培苗（13.39±6.67）%；不同部位、不同种质铁皮石斛多糖含量也有一定差异。
2. 采用HPLC法对铁皮石斛三种不同材料多糖的单糖组成进行了分析，结果表明：铁皮石斛多糖的单糖组分由D-甘露糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖和L-阿拉伯糖等7种单糖组成。其中，从愈伤组织到试管苗再到栽培苗，铁皮石斛单糖组成成分没有变化，只是含量变化较大，甘露糖和葡萄糖的含量在铁皮石斛三种不同材料中逐渐积累，含量越来越高；但是其它单糖的含量恰好相反，由愈伤组织到栽培苗，含量越来越低。甘露糖和葡萄糖的峰面积比愈伤组织为0.26±0.12，试管苗为4.29±2.14，栽培苗的叶片为23.63±19.57，栽培苗的茎为6.85±0.09，其中试管苗和栽培苗茎的甘露糖与葡萄糖的峰面积比符合2010版中国药典规定的范围2.4-8.0。
3. 铁皮石斛细胞培养繁殖速度快，且不受栽培条件的影响。为了利用细胞工程繁殖铁皮石斛材料，有必要对其愈伤组织及其培养物的药用价值以及药理活性展开研究。本研究以小白鼠为实验动物，以阿司匹林肠溶片为阳性对照，分别研究其凝血时间（CT）和尾出血时间（BT）来探讨铁皮石斛愈伤组织多糖是否具有抗凝血作用，结果发现铁皮石斛愈伤组织多糖均能够延长小白鼠的凝血时间和尾出血时间，其中，低剂量组10 mg/kg延长效果最显著，其抗凝血作用显著比阿司匹林肠溶片的效果要好，20 mg/kg时，抗凝血作用和阿司匹林肠溶片的效果没有显著性差异。表明，铁皮石斛愈伤组织多糖具有一定的抗凝血作用，有望为心血管疾病的治疗和预防提供新的药物和研究思路。
4. 对铁皮石斛愈伤组织多糖的DNA保护作用进行了研究，结果表明：铁皮石斛愈伤组织多糖对质粒1391Z的DNA损伤具有保护作用，最适浓度为5 mg/mL，其保护作用比芦丁的效果要好；铁皮石斛愈伤组织多糖对质粒pBI121和质粒1302的DNA损伤也有保护作用；铁皮石斛愈伤组织多糖对质粒pET28-A，质粒1391Z和质粒MD-19的DNA损伤均具有保护作用；单糖葡萄糖对质粒pET28-A和质粒1391Z的DNA损伤均具有保护作用，但是对质粒MD-19的DNA损伤没有保护作用，可能是由于单糖结构的变化与DNA结构的结合之间的作用力发生了变化。另外，不同浓度铁皮石斛愈伤组织多糖对质粒TTG1-2和质粒part-27的DNA损伤也均具有不同程度的保护作用。因此，铁皮石斛愈伤组织多糖具有DNA保护作用。
 
关键词：铁皮石斛，多糖，单糖组成，抗凝血作用，DNA保护作用

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