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论文摘要:超声提取对滑子菇多糖结构与活性的影响及wPNP-a1的结构分析

9079 人参与  2022年02月27日 15:01  分类 : 论文摘要  评论



滑子菇(Pholiota nameko)又名珍珠菇、滑菇、光帽鳞伞,它不仅营养丰富味道鲜美,而且具有较高的药用价值。滑子菇黏液具有促进免疫力、抗衰老等功效。滑子菇多糖具有抗氧化、抗肿瘤、抗衰老、增强免疫力等生物学活性。滑子菇多糖是滑子菇主要的活性成分,对其很多生理功能都有决定性作用,鉴于滑子菇多糖具有的多种药理、生理功效,对其进行深入系统的研究,为滑子菇资源进一步的开发利用提供一些理论依据,具有重要的意义。本文以滑子菇为原料,对滑子菇多糖的提取、分离纯化、生物活性、多糖结构等方面做了系统的研究,并且对比研究了不同提取方法对其提取、结构与活性的影响,得到如下结果:

       1. 采用传统热水浸提法和超声波提取法提取滑子菇多糖,得到水提滑子菇粗多糖wPNP和超提滑子菇粗多糖uPNP。两组糖的提取率分别为wPNP2.463%、uPNP4.376%,其多糖含量为wPNP65.17%、uPNP60.59%。说明超声波提取法可以有效提高滑子菇多糖的提取率,但是可能会降低多糖含量。

       2. 利用季铵盐沉淀法对wPNP和uPNP进行初分离,分别得到三个亚组分:酸性多糖组分wPNP-a和uPNP-a,中性多糖组分wPNP-b和uPNP-b,碱性多糖组分wPNP-c和uPNP-c。其得率从大到小分别是水提滑子菇多糖wPNP-a>wPNP-b>wPNP-c,超提滑子菇多糖uPNP-b>uPNP-a>uPNP-c。表明热水提取法所得滑子菇多糖中酸性多糖含量最高,超声波提取法所得滑子菇多糖中中性糖含量最高。通过SephadexG-150凝胶柱层析纯化wPNP-a、wPNP-b、uPNP-a和uPNP-b,并用高效液相色谱鉴定其纯度,结果显示纯化后的四个组分(wPNP-a1、wPNP-b1、uPNP-a1和uPNP-b1)都为均一多糖。

3. 通过HPLC、FTIR和NMR对比研究wPNP-a1与uPNP-a1、wPNP-b1与uPNP-b1的分子量、官能团与多糖构型的异同,结果发现:

(1)wPNP-a1的分子量(419310Da)大于uPNP-a1(312760Da),wPNP-b1的分子量(27991Da)大于uPNP-b1(21455Da),超提组分的分子量普遍低于水提组分。

(2)wPNP-a1和uPNP-a1都具有羟基O-H伸缩振动及O-H变角振动、氨基N-H变角振动或羰基C=O伸缩振动、羧基C-O伸缩振动。不同的是,wPNP-a1可能还具有羧基C=O非对称伸缩振动,而uPNP-a1可能有着酰胺基的N-H变角振动。wPNP-b1和uPNP-b1都具有羟基O-H伸缩振动及O-H变角振动、羧基C-O伸缩振动、都可能含有羧基或羰基的C=O伸缩振动、可能具有氨基或酰胺基的N-H变角振动。不同之处在于,wPNP-b1还具有磺酰基轴向配位的C-O-S伸缩振动或者吡喃环端基差向异构C-H以外的赤道键的C-H变角振动。

(3)结合红外光谱分析和核磁共振分析,确定滑子菇多糖wPNP-a1、uPNP-a1、wPNP-b1和uPNP-b1都为β-构型,且都不含乙酰基。

       4. 采用体外抗氧化模型,对热水提取滑子菇多糖wPNP和超声提取滑子菇多糖uPNP的体外抗氧化活性进行了对比研究,结果表明:这两种方法提取到的滑子菇多糖都具有较强的体外抗氧化能力,并且超声波提取法所得uPNP的抗氧化能力明显强于热水提取法所得wPNP。
       5. 用物理学方法GC、AFM和ESEM对水提滑子菇多糖wPNP-a1作进一步的结构分析,结果说明:wPNP-a1由木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖四种单糖组成,其摩尔比为3.91:2.77:1.91:1;wPNP-a1的分子间排斥力较大,分子间吸引力较小;wPNP-a1在云母表面呈直链状分布,链宽23nm左右,链高0.7-0.8nm。

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