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免费论文:天外遨游,模仿微重力以及过重刺激对秀美线虫肌肉关系基因和卵白的感化

7897 人参与  2022年03月27日 13:52  分类 : 论文摘要  评论

媒介:微重力所致的肌萎缩是生人天外遨游中展示的重要题目之一。在早期天外遨游中接洽者就提防到航天员体重鲜明低沉。一上面这是津液丧失的截止,另一个要害因为是肌品质低沉。然而,微重力引导肌萎缩的分子体制尚不领会。本课题重要接洽天外遨游,模仿微重力和过重培植对秀美线虫(C. elegans)体壁肌细胞构造和功效的感化,领会微重力引导肌萎缩的分子体制。试验本领:过程15天天外遨游/回旋模仿微重力或3天6.05 G过重处置后,对秀美线虫存在率和疏通本领举行查看,沿用Real-time PCR本领检验和测定了要害的五种肌关系基因表白,囊括:抗肌萎缩卵白基因(dys-1),电钻-环-螺回旋录安排因子基因(hlh-1),肌球卵白B重链基因(unc-54),L-型电压依附性钙通道卵白基因(egl-19),肌球卵白A重链基因(myo-3);运用荧光染色和Western Blotting本领检验和测定了三种肌关系卵白含量,囊括:肌动卵白(F-actin),肌球卵白A(myosin A),精致体(dense-body)。截止和领会:从统计截止领会,处置组和比较组线虫存在率没有鲜明变革,这同往常接洽截止相普遍。其余,天外组和模仿微重力组众生表露出疏通频次减慢,同声线虫在琼脂糖枯燥上zigzag匍匐轨迹波高与宽比值低沉,提醒处置后展示了疏通功效缺点。那些截止均证明微重力不妨引导线虫肌肉功效变换。而过重组线虫展现出疏通亢进,zigzag匍匐轨迹波率(波高/波宽)减少。那些数据对立微重力组在差异目标揭穿了力学感化对肌功效的效率。咱们沿用了免疫性荧光染色法对线虫体壁肌要害的构造卵白--肌球卵白A(myosin A)和精致体(dense-body)举行了径直样式学查看。三个试验组众生的肌球卵白荧光染色切片均表露肌细胞表面积减少,长度和亮度没有鲜明变革,为微重力和过重刺激底线虫会爆发肌萎缩供给了径直的样式学证明。其余,与比较组比拟,考查组线虫肌细胞中精致体表露线虫肌细胞巨细构造没有鲜明变革,然而其荧光强度鲜明贬低,提醒精致中华全国体育总会量有所低沉,表白肌细胞中细肌丝与其锚确定地点间的贯穿缩小。然而,F-actin染色各组未见明显性分别。天外遨游组,模仿微重力组和过重力组Western blotting的截止更透彻地表露了肌球卵白A流逝,进一步考证了力学处置后有肌萎缩爆发。之上那些截止与往常天外和模仿微重力考查截止相普遍。在天外遨游组和模仿微重力组,线虫体壁肌细胞dys-1表白明显增高,而hlh-1, unc-54, myo-3和egl-19 RNA程度在处置后低沉。差异,在过重组,dys-1, unc-54, myo-3和egl-19 mRNA 则下调,然而hlh-1却表白上调。体壁肌变革重要爆发在基因转录和卵白翻译程度,而且正文一切检验和测定均来自于完全众生,而不是像往常采自于单个细胞。计划:妇孺皆知抗肌萎缩卵白地方的卵白复合物DGC将细胞外基质与细胞内骨子贯串,连接感知外情况力学刺激,引导肌构造作出符合性反馈。咱们的截止表露了源代码DGC中抗肌萎缩卵白基因dys-1的变革,揭穿dys-1介入了骨头架子肌力学旗号传导,在微重力感知中有潜伏效率。另一上面,Hlh-1属于肌源性安排因子家属(MRFs),它重要遏制两种肌球卵白重链(MHC)异构体表白(MHC A 和B 辨别由myo-3 和Unc-54源代码)。Hlh-1变革会经过安排肌球卵白重链表白引导肌萎缩,这在western blotting截止中也获得了进一步证明。egl-19 源代码线虫L-型电压依附性钙通道卵白1亚基。egl-19基因安静是致死性的,而其功效低沉会惹起肌中断功效缩小,提醒该离子通道卵白在保护体壁肌中断上面有要害效率。革新性功效:1)初次对体验各别力学刺激(天外遨游,模仿微重力,过重力)后线虫肌肉构造举行了径直的样式学查看,创造三组均展示肌萎缩。然而,过重组线虫肌萎缩体制各别于前两组,咱们觉得是过重刺激过大,引导了肌张力连接增高性肌萎缩。2)体验过力学刺激的线虫在疏通动作上均展示了确定妨碍,然而过重组在处置后展现为疏通亢进,各别于微重和天外遨游后线虫的疏通功效缩小。并且线虫在琼脂板上的匍匐轨迹也表露了这两种各别刺激爆发的成果有分别。3)在基因表白上面引人注手段是抗肌萎缩卵白基因dys-1的变革。在天外遨游和模仿微重力组它鲜明增高,但在过重力组则贬低。咱们觉得是:微重力下dys-1代偿性减少是为了探查到更多力学旗号,在过重力下则差异。以是,咱们觉得任何底栖生物体所须要的力学刺激该当有一个最适范畴,力学旗号感知体例在重力变换时会做出符合性变革,再不保护肌细胞平常的中断舒张功效。然而本接洽是迄今为止独一一篇通讯了在线虫体内力学刺激下dys-1基因变革的作品,以是其看法还有待于更多接洽证明。4)至于hlh-1, unc-54, myo-3变革基础说领会肌萎缩爆发的基因安排体制。但有一个不同是过重力组固然从样式学上检验和测定到了肌萎缩,然而其hlh-1表白是上调的,领会觉得这是两种安排共通效率的截止,因为在较大重力底线虫没辙疏通寻食,须要有越发健康的肌肉构造制止重力疏通,以是引导肌肉关系基因转录安排因子Hlh-1上调,然而线虫在如许大的重力下没辙疏通又引导了肌张力连接增高,触发了肌萎缩发盼望制,以是unc-54和myo-3表白下调。5)egl-19基因表白在各组中均下调,证明其对肌萎缩爆发的感化是激动效率,但它与前方三个基因感化肌肉构造各别,它是经过感化功效起效率的。6)Western blotting试验截止定量地表露了肌萎缩水平,在卵白程度完备了肌萎缩爆发的分子道路。

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