摘要：建立表达HBV病毒受体SCCAI和AnnexinV的HBV易感小鼠模型

乙型病毒性肝性宏病毒的重要被熏染者是生人以及大猩猩等少量灵长类众生，往日对乙型病毒性肝性宏病毒的接洽常遭到规范是因为不足符合并可行的试验众生动作模子。按照暂时对乙型病毒性肝性宏病毒的接洽，创造乙型病毒性肝性宏病毒的DNA只有加入宿主细胞，就不受熏染构造和易熏染物种的控制，这表白不妨和乙型病毒性肝性宏病毒奇异贯串的受体与易熏染者即宿主肝细胞外表贯串的本领与熏染范畴的巨细正关系。鉴于已有的对于乙型病毒性肝性宏病毒受体上面的接洽，在几何大概的乙型病毒性肝性宏病毒受体中咱们统计出最有大概的受体：乙型病毒性肝性宏病毒贯串卵白（HBV-Binding Protein）和人肝细胞贯串卵白又叫作膜贯穿素（AnnexinV）。按照细胞转染试验领会，截止表白，在表白了乙型病毒性肝性宏病毒受体的几何细胞中，乙型病毒性肝性宏病毒在细胞中的复制水平由于受体表白程度各别而各别。其余尚有接洽职员创造某些细胞能自然的不被乙型病毒性肝性宏病毒熏染，但宏病毒的熏染和复制在转染表白受体后却爆发了，且不妨检验和测定到宏病毒滴度。一种不妨变换众生遗传消息的本领，不妨使获得新的基因表白性的本领不妨处置之上困难，所以展示了转基因众生。运用转基因的本领创造财经高效的众生模子为人宏病毒的防疫与致病性接洽供给了新的思绪。本试验将已有的接洽功效及对乙型病毒性肝性宏病毒受体的接洽运用于制备AnnexinV的转基因小鼠和制备表白乙型病毒性肝性宏病毒受体BP，并试验创造能同声表白两种基因的小鼠模子和乙型病毒性肝性宏病毒易感模子，试验本领如次：辨别运用PCR本领扩大与增加并赢得Annexin V和BP的全长cDNA序列，此进程以质粒3140878和4101988为沙盘，将其贯穿到PCAGGS的真核表白载体，经过双酶切与PCR来举行挑选克隆，截止获得了两种基因的表白载体PCAGGS-BP和PCAGGS-AnnexinV。咱们运用上述的两种表白载体，经过显微共打针的本领赢得了44只小鼠，个中转基因小鼠有19只，基因组中调整有BP和AnnexinV的转基因小鼠的有12只。过程连接传代后运用PCR和Southern检验和测定都证明12只转基因小鼠的基因组中简直有转入的两种基因的调整，转基因阴性率为27.2%，同声咱们对审定了转基因小鼠系中外源性基因的表白，咱们索取了转基因小鼠构造的总RNA，举行了RT-PCR的检验和测定，截止表白两种转入的基因都能举行活泼转录，进一步的western-blot审定证明了两种转入基因的共表白。各个founder小鼠过程传代已创造各相映的转基因小鼠系。

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