免费论文摘要：拟黑多刺蚁homothorax基因的克隆及其在个别发育的mRNA程度表白的定量接洽

拟黑多刺蚁（Polyrhachis vicina Roger）从属于膜翅目（Hymenoptera），蚁科（Formicidae），多刺蚁属（Polyrhachis），属于典范的营聚居真社会性虫豸。具备普遍的多态局面，等第分裂为兵蚁、雌蚁（蚁后）和雄蚁，具备动作搀杂和单干精确的特性。是接洽虫豸发育体制上面较好的资料。Homothorax ( Hth )是Meis家属中的分子，是Hox基因的扶助因子，重要生存于节肢众生中，对胚胎和若虫的发育起着要害的效率，它与附肢、核心和外周神经体例、眼、唾液腺等发育出色关系。本舆论以拟黑多刺蚁为接洽资料，索取总RNA，沿用RT-PCR及RACE本领从拟黑多刺蚁体内克隆出Hth基因的全长cDNA序列，并运用底栖生物消息学本领对其核苷酸序列和猜测的卵白序列举行领会；经过荧光及时定量PCR本领对Hth基因在拟黑多刺蚁体内的mRNA程度的对立定量表白情景举行了接洽。接洽截止如次：1.基因克隆：拟黑多刺蚁Hth基因 cDNA序列全长为2111 bp，包括一个长度为1257 bp的盛开观赏框。5’ 端非源代码区（5’-UTR）和3’ 端非源代码区（3’-UTR）长度辨别为290 bp和 567 bp， 3’-UTR区看来典范的加尾旗号AATAAA以及长度为17 bp的PolyA尾。源代码含有418个氨基酸酸残基的卵白质，该卵白质分子量和等电点辨别为45.2 kDa和 5.65。将该基因定名为Pv-Hth，所获序列上传到GenBank，赢得的序列号为GU324093。2.序列领会：同源性领会表白Pv-Hth与意大利蜜蜂Hth的氨基酸酸序列一致性达98.2 %，与脊椎众生Meis家属分子的一致性在62.7 %-79.4 %之间。底栖生物消息学领会表白，该卵白具备同源异形构造域，含有1个N-糖基化位点、4个卵白激酶C盐酸化位点、9个酪卵白激酶II盐酸化位点、2个酪氨酸激酶盐酸化位点、1个酰胺位点和8个N-豆蔻酰化位点，那些位点为接洽该卵白质的功效供给了消息。3.对立定量接洽：沿用荧光及时定量PCR本领对拟黑多刺蚁发育的各别阶段虫体、各别等第若虫完全及各别等第若虫头部的Pv-Hth在 mRNA表白程度长进行对立定量领会。截止表露，Pv-Hth在除去蛹期的发育阶段均有表白，胚胎期表白量最高，毛蚴期发端表白量明显低沉，发育到第二龄毛蚴时，表白量有小幅飞腾，但之后低沉，三龄和四龄居于同一表白程度，蛹期遏止表白。Pv-Hth基因从胚胎到蛹期表白的变革趋向与拟黑多刺蚁全反常发育的进程和特性出色关系，然而在蛹期遏止表白的简直因为还有待于于进一步的接洽。Pv-Hth基因mRNA在拟黑多刺蚁三个等第若虫浑身及头部中的表白情景是普遍的，在雄蚁中表白量最高，兵蚁次之，雌蚁最低。雄蚁浑身及头部的表白量辨别比兵蚁浑身及头部高2.6倍和5倍，比雌蚁浑身及头部高6.5倍和9倍。Pv-Hth基因雄蚁中的高表白，一上面与其样式特性相关，另一上面大概与等第分裂及相映的功效相关。内项接洽初次从社会性虫豸拟黑多刺蚁中克隆Hth基因的全长cDNA序列，并将序列上传到GenBank；序列比对领会表白，Pv-Hth与脊椎众生的Meis 家属分子、秀美线虫Unc-62、节肢众生的Hth有很高的一致性，表白Meis家属基因在众生中的进化是很顽固的；沿用对立荧光及时定量本领接洽创造，Pv-Hth mRNA在拟黑多刺蚁各别发育阶段虫体、各别等第若虫及各别等第若虫头部的表白情景有很大分别，提醒Hth基因与拟黑多刺蚁的发育出色关系。那些截止将为深刻商量Hth在虫豸中的关系功效接洽奠定普通。

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