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鱼腥草为三白草科蕺菜属植被蕺菜(Houttuynia cordata Thunb.)的陈腐地上和地下局部以及枯燥花期地上植株,具备清热解毒、消痈排脓、利尿通淋的工效,是国度保健部正式决定的“药食两栖”国药材。连年来,跟着国表里对鱼腥草接洽的连接深刻,人们接踵从鱼腥草中索取出多种自然活性因素,囊括蒸发油、黄酮等。个中,鱼腥草多糖(HCP)是重要水溶性因素之一,具备多种底栖生物活性,变成鱼腥草药效物资普通的接洽热门。但是,暂时对于HCP的构成特性及底栖生物活性接洽却罕见通讯。其余,在多糖的单糖构成表征进程中,鉴于现有的HPLC辨别本领,常常只能试验6-8种单糖的基线辨别,鲜明感化单糖构成和多糖构造领会的精确性。所以,基于鱼腥草多糖接洽中生存的题目,拟建立新式糖构成高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)领会本领,以期实行国药多糖中10种罕见单糖的基线辨别。同声,拟经过全党外抗氧化和抗肿瘤模子对HCP的底栖生物活性举行评介。本课题以湖南株洲产的鱼腥草枯燥地上局部为材料,沿用水提醇沉法治备HCP。经过Box-Behnken相应面优化安排体例地对HCP索取工艺举行优化。经过1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前派生化HPLC法,建立鉴于C18色谱柱和惯例紫外检验和测定器(UVD)的10种罕见恢复单糖的辨别领会本领,并将其用来HCP的单糖构成表征。经过DPPH自在基、超氧阴离子、羟自在基、恢复本领和亚铁离子螯合体制比拟了HCP和鱼腥草各别溶剂索取物的抗氧化本领。同声,经过MTT法、LDH法和流式细胞术(FCM)评介HCP的抗肿瘤活性。沿用Box-Behnken相应面安排法挑选出了HCP索取的最好浸提前提拉拢:浸提温度为77.96 ℃,浸提功夫为4.41 h,液料比为30∶1,在此前提下HCP的得率为2.953%。同声测得HCP的总糖含量为78.6%,糖醛酸含量为26.2%,卵白质含量为0.41%。按照恢复单糖PMP衍底栖生物的构造特性及其在HPLC的C18色谱柱管壁的吸附特性举行色谱辨别优化。经过安排三乙胺(TEA)浓淡、乙腈比率和柱温,初次在13.5 min和19 min内实行了PMP派生的10种单糖的高效辨别。运用创造的新式糖辨别模子表征HCP,创造HCP的单糖构成辨别为甘霖糖(Man)、鼠李糖(Rha)、葡糖糖醛酸(GlcUA)、半乳糖醛酸(GalUA)、葡萄糖(Glc)、木糖(Xyl)、半乳糖(Gal)和阿拉伯糖(Ara),其摩尔百分含量辨别为1.8%、17.2%、6.8%、29.4%、5.3%、2.1%、24.0%和13.5%。领会截止表露,HCP是一种富含GalUA的典范碱性杂多糖。抗氧化活性接洽截止表白,HCP和鱼腥草的各别溶剂索取物均具备确定的活性,且表露量效联系。个中鱼腥草水提物(WE)的自在基废除活性和恢复本领最高,HCP动作水溶性因素是WE的重要活性物资。同声,经过全党外抗肿瘤试验创造HCP对人乙状结肠癌细胞LoVo、人肝癌细胞Hep G2和小鼠白血病细胞L1201的成长均具备明显的控制效率,而且展现出确定的剂量依附性,个中对人乙状结肠癌细胞LoVo的控制效率最强。流式细胞术的领会截止表白HCP能明显地开辟LoVo细胞凋亡并能将LoVo细胞控制在G0/G1期。然而,对于HCP开辟LoVo细胞凋亡和周期妨碍体制,尚需进一步的深刻接洽。正文初次经过Box-Behnken安排决定了HCP的最好索取工艺,为鱼腥草资源的优化运用供给了科学按照。初次建立的PMP柱前派生化HPLC领会本领实行了10种罕见恢复单糖辨别审定,该本领具备大略、赶快、精确等特性,可普遍用来多糖构造领会进程中的单糖构成表征。初次创造HCP具备较强的全党外抗氧化活性和肿瘤控制效率,为其在医药和食物范围的运用奠定了表面普通。
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