免费论文摘要：华夏林蛙辛基酚表露后精巢差减cDNA文库的建立及领会

为证明烷基酚对两栖众生精巢功效的干预体制，探究烷基酚对基因表白的感化，将雄性华夏林蛙(Rana chensinensis)表露于10-6 mol/L辛基酚(4-tert-Octylphenol, OP)水体，在处置30天取其精巢为接洽资料，用控制性差减杂交本领(suppression subtractive hybridization, SSH)建立平常和OP表露的华夏林蛙精巢的差减cDNA文库，挑选OP对华夏林蛙性腺发育感化的基因，以求商量OP干预两栖众生的生殖内渗透和成长发育的分子体制。1. 胜利建立了华夏林蛙10-6 mol/L OP表露后华夏林蛙精巢的差减cDNA文库，共赢得180条表白序列标签(expressed sequence tag, EST)。那些分别表白基因重要为贯串卵白、ATP合酶、钙贯串卵白、肌动卵白、蔓延因子、线粒体和激酶的关系基因。犯得着提防的是，个中展示怀孕奇异性β1糖卵白9基因(pregnancy specific beta-1-glycoprotein 9, PSG9)和怀孕关系血浆卵白A基因(pregnacy-associated plasma protein A, PAPP-A)等雌性胎灵巧物奇异表白的基因；并有部分癌基因表白。基因本质(Gene Ontology, GO)分门别类表露，底栖生物进程有87条，细胞因素有106条，分子功效有68条(含一因多效)。在底栖生物进程中，新陈代谢进程占45.98%，细胞进程占24.14%，怀孕进程占13.79%，转录调节和控制占6.90%，应激反馈占3.45%，炎症反馈占3.45%，基因表白占1.15%，氧化恢复进程占1.15%。在细胞因素中，细胞局部占45.28%，细胞器因素占29.25%，细胞膜占14.15%，细胞骨子占11.32%。在分子功效中，蔓延因子活性占29.41%，分子构造活性占23.53%，翻译安排活性占22.06%，贯串活性占14.71%，催化活性占7.35%，转运活性占2.94%。在底栖生物进程中新陈代谢进程所占比率最高，在细胞因素中细胞局部所占比率最高，在分子功效中，蔓延因子活性所占比率最高。那些截止表白OP对华夏林蛙的精巢的成长发育爆发要害感化，个中重要感化了新陈代谢进程、细胞质因素和蔓延因子活性，而且展示了与雌性化效力关系的基因。2. 应用半定量RT-PCR（Semi-quantitative RT-PCR）本领辨别检验和测定差减cDNA文库中PSG9和PAPP-A，这两个基因平常情景下仅在喂奶众生的胎盘中表白，在精巢、卵巢、肝脏和脑等构造中均不表白。在10-6mol/L OP表露30天的华夏林蛙精巢中，PSG9和PAPP-A均表白。而且PSG9和PAPP-A在电泳图中条带亮度鲜明高于管家基因β-actin，略宽，表白其表白程度高于β-actin。而比较组的PSG9和PAPP-A均不表白。以是构想OP开辟了PSG9和PAPP-A在华夏林蛙精巢中的表白，进而大概干预精巢的平常发育。

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