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自1962年葡萄糖底栖生物传感器问世此后,用酶动作辨别元件从来是传感器接洽的热门。之以是酶被普遍运用,是由于酶分子的莫大奇异性和高催化功效,酶的变换数普遍比自愿反馈进程高出几个至十几个数目级,使生去世学反馈进程得以夸大。但是,自然酶卵白分子并非白璧无瑕,比方,到暂时为止,大普遍酶传感器或由其余卵白质分子形成的底栖生物器件(如卵白质芯片及卵白质计划机、卵白质分子传感器、卵白质分子呆板等)并没有像人们所憧憬的那么赢得普遍运用,除去器件的题目除外,重要在乎底栖生物分子自己固有的缺点,如简单受百般情况因子的感化,即宁静性不许满意诉求,引导所研制的底栖生物器件的宁静性、运用寿命和重现性不许满意本质需要。那些题目长久此后搅扰着底栖生物领会器件的接洽者们。 模仿酶(enzyme mimics)即人为合成酶,即用人为本领合成具备酶本质的一类催化剂,来模仿酶对其效率底物的贯串和催化进程。分子印迹本领被表明是爆发酶贯串部位最佳的本领之一,运用分子印迹方法治备的会合物模仿酶催化剂,具备抗卑劣情况、宁静性高、运用寿命长、制备进程大略等特性,填补了自然酶的缺陷,具备杰出的运用远景。 碘仿即不妨动作化学农药,也不妨动作神经性毒剂用来搏斗和恐惧报复。所以,对碘仿的高效降解不只不妨减罕见机磷农药残留,并且不妨废弃碘仿神经性毒剂类化学兵戈。碘仿水解酶(organophosphorus hydrolase, OPH)又名盐酸三酯酶(phosphotriesterase, PTEs),不妨水解普遍的碘仿复合物,是降解碘仿毒剂的重要酶类。OPH不只不妨用来降解处置碘仿农药残留和废弃碘仿神经性毒剂,也可用来检验和测定碘仿类仿古传感器的建立,但是,自然OPH在重组菌株中含量太低,且不宁静、易失活,难以制备,暂时尚未商品化。 正文运用分子印迹模仿自然OPH的活性重心,制备了具备高效催化水解碘仿活性水解的人为模仿OPH,并对模仿酶的催化本能举行了接洽。 第一章为弁言,主假如对模仿酶的接洽近况、碘仿农药、碘仿水解酶及分子印迹本领的制备和运用等上面举行了概括。 在第二章中,经过积淀会合的本领,以商品化的1-乙烯基咪唑,甲基丙烯酸为功效单体,对氧磷水解过度态一致物4-硝基苄基盐酸二乙酯为沙盘分子,在紫外光映照下合成了碘仿水解模仿酶分子印迹会合物微球,所得会合物微球分别性好、粒径巨细平均。当沙盘分子和功效单体的摩尔比为1:15时,合成的碘仿水解模仿酶分子印迹会合物微球具备高辨别性和采用性,能灵验地水解对氧磷,与对氧磷自愿水解比拟,印迹会合物(MIP3)催化水解对氧磷的活性普及了6.5×104倍,不加沙盘分子前提下合成的非印迹会合物(NIP3) 普及了2.3×104倍,且MIP3比NIP3的催化水解功效普及了2.8倍,表露了杰出的水解功效。对对氧磷的催化水解最大速度Vm为0.48 mM/min,米氏常数Km为0.11 mM。 在第三章中,进一步按照OPH的活性重心构造,安排了双功效单体非金属共同物动作分子印迹的功效单体,以甲基丙烯酸为扶助功效单体,对氧磷水解过度态一致物4-硝基苄基盐酸二乙酯为印迹沙盘分子,在光激励下经过积淀会合合成了碘仿水解模仿酶分子印迹会合物微球,与对氧磷自愿水解比拟,印迹会合物(MIP)催化水解对氧磷的活性普及了1.6×105倍,不加沙盘分子前提下合成的非印迹会合物(NIP) 普及了7.9×104倍,且MIP比NIP的催化水解功效普及了2.0倍,碘仿水解模仿酶对对氧磷的催化水解最大速度Vm为0.38 mM/min,米氏常数Km为0.025 mM。制备的人为模仿OPH希望用来降解处置碘仿农药残留和废弃碘仿神经性毒剂,也可用来检验和测定碘仿类仿古传感器的建立,进而普及该类底栖生物传感器的适用性和宁静性。
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