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手段:血液震动前提下,血小板膜糖卵白Ibα(GPIbα)与受伤害的血管壁处血管性血友病源子(VWF)的贯串,使得血小板粘附、会合并产生血栓。血小板GPIbα胞外局部的酶切是血小板功效的要害安排体制。正文旨在接洽流体剪切力能否能开辟GPIbα的胞外局部从血小板膜外表被酶切。本领:创造血小板震动腔检验和测定模子。清洗血小板悬液,在确定剪切率卑劣过VWF包被的毛细玻璃管,或在锥板粘度计中接受确定功夫的剪切效率。运用流式细胞术检验和测定血小板膜外表GPIbα的表白量和血小板的活化水平;运用抗GPIbα N端和C端的抗原,经过western blot辨别检验和测定GPIbα N端和C端的酶切情景;经过血小板活化控制剂和少许卵白酶控制剂,接洽血小板活化和卵白酶等成分在剪切力开辟的GPIbα酶切中的效率体制。截止:血小板在过程所创造的震动腔效率之后,GPIbα的胞外局部缩小,同声在胞里面分爆发一个分子量为17kDa安排的小片断,该小片断跟着GPIbα胞外局部的缩小而增加。GPIbα胞外局部被酶切的水平,跟着包被的VWF的浓淡的升高和剪切力效率功夫的延迟而巩固,但随剪切力巨细的减少而缩小。western blot和流式细胞术的截止表露,剪切力开辟的GPIbα酶切与调整素αIIbβ3和血小板的活化无干。其余,可穿膜的calpain控制剂和metalloproteinase控制剂可灵验地控制剪切力开辟的血小板GPIbα的酶切。论断:胜利创造血小板震动腔检验和测定模子。接洽表白,震动前提下血小板与VWF的彼此效率,可惹起calpain和metalloproteinase调节和控制的 GPIbα的酶切。这一新的GPIbα酶切体制的创造,对看法血小板在血栓产生中的心理调节和控制体制具备要害价格。
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