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洪量接洽表白曲蟮体内含有CAT、SOD、POD、GR、GSH-PX、GST等抗氧化酶。抗氧化酶是一类具备要害心理功效的酶,它们能准时废除结余的氧自在基,使体内氧自在基浓淡保护在一个利于无害的心理程度,进而提防肌体遭到过氧化学物理的妨害,所以,从曲蟮体内辨别纯化出该类抗氧化酶对于拓宽抗氧化酶的根源及曲蟮的归纳运用都具备要害的意旨。暂时,酶的辨别纯化重要囊括酶的索取、初辨别、纯化等办法,波及的重要本领有抽提、积淀、离心、盐析、超滤、离子调换层析、亲和层析、凝胶过滤、电泳等。本接洽沿用闪式索取本领,固液比为1:4(m/V)的2.5mmol/L pH7.0盐酸缓冲液,索取电压110V,索取功夫2min,从曲蟮体内索取出SOD、CAT,并经过羧甲基纤维素CM-22离子调换层析实行SOD和CAT的共同索取辨别,SOD、CAT的活性接收率辨别到达88.23%和 69.5%。在纯化学工业艺中过程盐酸安非拉酮积淀和柱层析本领获得曲蟮SOD纯品,比活到达9352U/mg,接收率18.44%,纯化倍数474倍,产品在SDS-PAGE上为简单条带,其亚基分子量约为17kD。纯化后的曲蟮SOD在35℃~55℃之间具备杰出的热宁静性,最适温度为45℃,pH值耐受范畴4~11。经过柱层析纯化了曲蟮CAT,比活到达22606U/mg,接收率14.98%,纯化后的曲蟮CAT在25℃~45℃之间具备宁静性,最适温度为35℃,最适pH值为6,在pH值4~10之间具备较好的宁静性。
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