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茶多酚是茶叶中儿茶素类、黄酮类、酚酸类和花样素类复合物的总称, 是茶叶中的重要底栖生物活性因素,约占茶叶干重的30%~42%。茶多酚中最要害的因素是黄烷醇类的多种儿茶素,个中含量最多的是EGCG,约占茶多酚的50%~75%。那些具备多酚构造的物资因为其抗氧化活性,被证明对人体安康具备多上面的有益效率。另一上面,因为茶多酚在领会新陈代谢的进程中大概波及自在基中央体,不妨诱发活性氧天生,不妨径直大概转弯抹角爆发促氧化效率,对底栖生物分子和构造形成妨碍。所以,茶多酚既有抗氧化效率,也有促氧化效率,即所谓的双重效率。正文运用人红细胞动作试验模子,接洽了在无附加威吓时和在溶菌酶纤维生存时五种茶多酚(EGCG[1]、ECG[2]、EGC[3]、EC[4]和C[5])与红细胞的彼此效率。试验截止表白,五种茶多酚中EGCG和EGC对红细胞有鲜明的效率。当无附加威吓时,EGCG和EGC对红细胞有促氧化效率,促氧化效率重要展现为开辟红细胞形变、醌类卵白质产生和缩小膜GSH含量水同等,引导红细胞膜的磷脂脂肪酸氧化,膜骨子卵白会合等,其效率巨细与浓淡和效率功夫呈正关系。EGCG对红细胞膜的促氧化体制与对苯醌的一致。当有溶菌酶纤维生存时,EGCG和EGC对溶菌酶爆发的细胞毒性有抗氧化效率。试验的重要本领和论断:一、茶多酚对溶菌酶纤维爆发的细胞毒性的感化1. 溶菌酶纤维与红细胞膜的彼此效率索取红细胞膜辨别与溶菌酶卵白和溶菌酶纤维彼此效率,用SDS-PAGE检验和测定红细胞膜卵白谱带。创造溶菌酶卵白与红细胞膜骨子卵白无效率,溶菌酶卵白经孵育变成溶菌酶纤维后与膜卵白效率,引导了膜骨子卵白会合,且膜骨子卵白会合量与溶菌酶纤维孵育功夫成正比。截止表白,溶菌酶卵白对血红细胞无毒性效率,溶菌酶纤维对血红细胞有毒性效率。2.EGCG对溶菌酶纤维所致的红细胞膜卵白伤害的感化将EGCG,溶菌酶纤维和红细胞举行彼此效率,用SDS-PAGE检验和测定红细胞膜卵白谱带。创造溶菌酶纤维对红细胞膜骨子卵白有伤害效率,引导膜骨子卵白会合。EGCG对溶菌酶纤维所致的红细胞膜骨子卵白的伤害有确定得减缓效率。得出EGCG对溶菌酶纤维所致的红细胞膜卵白伤害具备抗氧化效率。3. 茶多酚对溶菌酶纤维所致的红细胞样式变革的感化红细胞过程溶菌酶纤维处置后,经过扫描电子显微镜查看看来红细胞爆发了轻度会合,在红细胞范围展示小的膜泡,再有小局部细胞爆发形变,边际展示棘突。觉得那些小的膜泡是红细胞在溶菌酶纤维效率下膜溢出或破坏局部再次会合而成。EGCG和EGC对溶菌酶纤维所致的红细胞会合有所减缓,红细胞范围不复爆发小的膜泡。二、 茶多酚与红细胞膜的彼此效率1.茶多酚对红细胞膜卵白谱带的感化索取红细胞膜与茶多酚彼此效率,用SDS-PAGE检验和测定红细胞膜卵白谱带。创造EGCG和EGC开辟红细胞膜骨子卵白会合,VC将EGCG和EGC开辟的红细胞膜骨子卵白会合实足恢复。这种自在基废除剂VC对红细胞膜骨子卵白会合的恢复局面,证明EGCG和EGC的促氧化效率是经过开辟爆发自在基而实行的。经过进一步的接洽浓淡对EGCG和EGC的促氧化活性的感化,创造EGCG和EGC的促氧化活性均具备浓淡依附性。以EGCG来说,浓淡1 μg/ml以次对膜卵白简直没有效率,浓淡1 μg/ml之上其氧化活性与浓淡呈正关系,看来,高浓淡利于于茶多酚爆发促氧化效率。2.茶多酚对红细胞膜GSH含量的感化GSH含量的增减可转弯抹角反应细胞氧化威吓情景。沿用Ellman本领测定红细胞膜GSH含量。创造茶多酚可使红细胞膜GSH含量贬低,程序为EGCG>EGC»ECG≈EC≈C。觉得本试验进程中GSH含量贬低的因为是:EGCG和EGC的促氧化进程中诱发自在基的爆发所致。3.茶多酚多红细胞膜脂质的感化膜磷脂的构成及含量变革可反应细胞膜的构造和功效的变换。经过HPLC领会红细胞膜磷脂,在经EGCG效率后,红细胞膜中重要的三种磷脂(PC,PE和PS)领会值贬低, 反应了膜磷脂分子中不饱和脂肪酸的含量缩小,觉得这是由EGCG促氧化进程中爆发的自在基与其爆发氧化反馈,引导红细胞膜磷脂脂肪酸氧化所致。PE,PC和PS含量跟着EGCG浓淡的减少而缩小。4.茶多酚对红细胞的样式感化用五种茶多酚(EGCG、ECG、EGC、EC和C)处置红细胞,镜下查看看来ECG、EC和C效率很小,红细胞没有爆发会合,细胞大概没有爆发形变,惟有微量细胞爆发形变,边际展示棘突;EGCG和EGC处置的红细胞爆发了轻度会合,有局部细胞爆发形变,边际展示棘突。觉得是因为EGCG和EGC诱发爆发自在基引导红细胞变形性低沉以及红细胞膜构造变换感化红细胞变形性所引导。5 对苯醌和EGCG对红细胞膜效率的比拟用SDS-PAGE检验和测定红细胞膜卵白谱带,创造EGCG和对苯醌均开辟膜卵白会合体产生,那些高分子会合体重要根源于血影卵白,锚卵白,带3卵白,带4.2卵白和肌动卵白,且均可被VC恢复,证明EGCG和对苯醌对红细胞膜卵白的效率一致;沿用Ellman本领测定红细胞膜GSH含量,创造EGCG和对苯醌均可使红细胞膜GSH含量贬低,且GSH含量贬低水平与EGCG和对苯醌的浓淡成正比,证明EGCG和对苯醌对红细胞膜GSH含量的感化一致;经过HPLC领会红细胞膜磷脂,经EGCG和对苯醌效率后,均开辟红细胞膜中重要的三种磷脂: PC,PE和PS领会值贬低,证明EGCG和对苯醌均引导红细胞膜的磷脂脂肪酸氧化,它们对红细胞膜脂质的效率一致。所以,EGCG对红细胞膜的效率一致于对苯醌,有力的证领会EGCG对红细胞膜有促氧化效率,而且在该进程中有醌类卵白质和半醌自在基天生。6.五种茶多酚对红细胞的各别效率经过上述截止创造,五种茶多酚(EGCG、ECG、EGC、EC和C)对红细胞具备各别的效率,ECG、EC和C对红细胞简直没有效率,EGCG和EGC对红细胞有促氧化效率。这种茶多酚氧化本领的分别性应归纳于茶多酚的构造分别。
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