摘要：rhG-CSF动员和骨骼肌电刺激促进大鼠骨折愈合及其可能机制

手段：在骨科范围，怎样加速骨折愈合、调节骨不连和骨折的推迟愈合是该范围的热门题目，正文接洽手段旨在商量经皮骨头架子肌电刺激共同干细胞启发对大鼠骨折愈合进程中骨重修及细胞增殖的感化及其大概体制。本领：采用3月龄大鼠（由西安交通大学试验众生处置重心供给）80只，体重180g～220g。随机分为4组，每组20只：骨折模子组（A组）；模子+启发剂组（B组）；模子+电刺激组（C组）；模子+启发剂+电刺激组（D组）。各组均沿用国度规范啮齿类众生枯燥草料豢养，自在茶饭。用自创造模支架创造大鼠胫骨紧闭性骨折模子，刺激模子参照吕晓宇和彭亮刺激形式相结兼并略加变换创造大鼠的电刺激模子。骨折后分2周、4周、6周和8周取材，制成不脱钙硬构造切片和脱钙骨切片，应用四环素和茜素红双荧光标志、特出染色、免疫性构造化学SABC法检验和测定骨构造在骨折愈合进程中构造的变革、钙的堆积、成骨情景及细胞因子和细胞增殖关系卵白的表白。截止：1 用大鼠紧闭性骨折造模支架形成大鼠胫骨中段骨折，经X光片确定，胜利创造了大鼠胫骨中段紧闭性骨折模子。2 rhG-CSF和（或）骨头架子肌电刺激可激动大鼠骨折愈合后的功效回复。骨折后简单rhG-CSF效率和简单骨头架子肌电刺激以及rhG-CSF共同骨头架子肌电刺激效率均可激动骨折愈合后的功效回复，而rhG-CSF共同骨头架子肌电刺激激动大鼠骨折愈合后的功效回复功效最明显。3 rhG-CSF和（或）骨头架子肌电刺激可使大鼠骨折愈合后软骨骨痂数目增加，骨构造钙化爆发较早，骨折愈合水平较好，更加以电刺激组和电刺激+启发剂组功效更鲜明。提醒，骨折保守行骨头架子肌电刺激共同骨髓干细胞启发，不妨减少骨折愈合早期的软骨细胞数目激动软骨内成骨，加快骨折愈合。4 简单rhG-CSF启发和简单电刺激均可使患肢骨2次标志线间距随愈合功夫延迟而渐渐减少，和模子组比拟较明显性升高，单元表面积对立荧光强度截止表露，简单干涉组可感化骨折愈合过程中钙盐的堆积，激动骨基质钙化。5 rhG-CSF启发和骨头架子肌电刺激共同效率可使患肢骨2次标志线间距渐渐增大，在造模后第6周到达峰值。提醒在骨折衷后期钙盐堆积量最大；与简单干涉组比拟患肢骨2次标志线间距明显性增大，表白共同干涉比简单干涉更无助于于骨折愈合。6 rhG-CSF启发和骨头架子肌电刺激对骨折大鼠骨构造细胞成长因子表白爆发感化。骨折愈合前期软骨和骨细胞bFGF和c-kit明显性升高；简单电刺激和电刺激共同启发干涉，可激动软骨和骨细胞的c-kit表白在第4周到达峰值，而简单启发剂组在第6精心峰值；各组TGF-β1和bFGF均在第6周阴性表白到达峰值；在骨折愈合后期各细胞因子表白均有所低沉，但仍高于比较组。表白简单刺激和共同刺激办法均可各别水平激动骨开辟因子的表白，激动骨折愈合。7 rhG-CSF启发和骨头架子肌电刺激对骨折大鼠骨构造增殖关系卵白表白爆发感化。电刺激和启发剂共同效率后，PCNA、BrdU和ki-67在骨折愈合进程中表白渐渐升高，表白细胞增殖关系卵白在骨折愈合各功夫均有表白，但在各别功夫表白细胞的品种各别，早期主假如分割期的间充质干细胞及软骨细胞，后期是成骨细胞。在rhG-CSF效率的大鼠骨折愈合早期BrdU阴性表白并不明显，后期有所升高，PCNA和ki-67则连接高表白；简单电刺激组细胞增殖关系卵白的表白也随骨折愈合表白渐渐升高，更加BrdU表白升高具备极明显性分别。表白，简单电刺激与简单干细胞启发比拟更利于于骨髓干细胞的增殖及分裂。二者共同效率后PCNA、BrdU和ki-67表白峰值出此刻第6周，提醒双重激动效率使细胞增殖数目减少，且居于有丝分割期的细胞数目较多，利于于骨构造的重修。论断：骨头架子肌电刺激革新骨折处范围的力学情况，在骨折部位产生微动效力，为成骨效率供给力学前提，可使大鼠骨折愈合后软骨骨痂数目增加，骨构造钙化爆发较早，患肢骨2次标志线间距随愈合功夫延迟而渐渐减少，骨折愈合水平较好，激动骨折愈合后的功效回复。在此进程中，TGF-β1、PCNA和BrdU表白明显性升高，电刺激激动限制细胞因子的渗透和开释，加快骨折愈合。所以，沿用早期微动办法的骨折愈合功效优于保守的生石膏夹板一致恒定办法。rhG-CSF启发自体骨髓干细胞，激动骨髓间充质干细胞和造血干细胞的开释并向骨折部位迁徙，减少干细胞向成骨、成软骨目标的分裂，激动软骨内成骨、骨基质钙化和骨折部位血管鼎盛，加快骨折愈合，激动大鼠骨折愈合后的功效回复。在此进程中，骨折愈合前期软骨和骨细胞TGF-β1、bFGF、PCNA、BrdU和ki-67在第6周到达峰值；在骨折愈合后期各细胞因子表白均有所低沉，但仍高于比较组。所以，沿用早期自体骨髓干细胞启发办法激动骨折愈合的功效优于保守的生石膏夹板一致恒定办法。rhG-CSF启发和骨头架子肌电刺激共同效率后，既可激动骨髓间充质干细胞和造血干细胞的开释并向骨折部位迁徙，减少干细胞向成骨、成软骨目标的分裂，又保护了骨成长所须要的力学情况，革新限制的血液轮回，加速骨改造过程；二者均可巩固骨开辟因子和细胞增殖关系卵白的表白，从而减少骨折愈合功夫。所以，骨头架子肌电刺激惹起的微动效力和干细胞启发激动骨折愈合的功效优于简单骨头架子肌电刺激、rhG-CSF启发和保守的生石膏夹板一致恒定等办法。

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