摘要：超声激活原卟啉 IX 诱导小鼠白血病 L1210 细胞凋亡

??? 声能源学疗法(Sonodynamic therapy, SDT )是1989年Umemura S等人在接洽超声贯串血卟啉抗肿瘤效力普通上提出的一种肿瘤调节本领。因为超声不妨穿透深层构造，并能激活奇异性富集在肿瘤构造中的声敏剂分子，有对准性地刺伤肿瘤细胞而对范围平常构造伤害较小，所以，该疗法具备杰出的运用远景。连年来，本课题组在对SDT接洽中创造，低强度超声激活血卟啉、原卟啉Ⅸ等不妨开辟肿瘤细胞凋亡，而且原卟啉Ⅸ (Protoporphyrin Ⅸ，PpⅨ) 动作血卟啉衍底栖生物的一种灵验因素，其贯串超声开辟肿瘤细胞凋亡不妨爆发比血卟啉更强的效率。但是，各别肿瘤细胞经各别的超声参数及声敏剂处置后，其凋亡特性亦有分别，超声激活PpⅨ开辟肿瘤细胞凋亡的简直效率体制尚不领会。??? 本舆论以国度天然科学基金名目“超声激活血卟啉开辟肿瘤细胞凋亡的分子体制的接洽”和“声能源学疗法介导白血病细胞的牺牲形式及其体制接洽”为依靠，沿用频次为1.1 MHz的聚焦超声贯串浓淡为1 μg/ml的PpⅨ效率于离体培植的L1210小鼠白血病细胞，经过接洽声能源学处置后细胞内与凋亡关系的心理生物化学目标的变革及关系卵白的表白变革，发端商量声能源学疗法开辟肿瘤细胞凋亡的分子机理，暂时博得的试验截止如次：????? 1. MTT法检验和测定细胞存活率创造，超声贯串PpⅨ处置L1210小鼠白血病细胞较简单PpⅨ组、简单超声组不妨明显控制细胞增殖，而且到处理后功夫的延迟，细胞存活率进一步低沉，于处置后8 h降至最低程度（36.34 %）。????? 2. Western blotting检验和测定Caspase-3的表白创造，SDT组和简单超声组展示鲜明的Caspase-3剪切片断，而比较组和简单PpⅨ组均未展示Caspase-3活化片断。而且SDT组Caspase-3剪切片断的表白量较简单超声组高；经过流式细胞仪贯串Annexin V/7-AAD荧光双染检验和测定各组凋亡细胞百分比创造，SDT组凋亡细胞百分比鲜明高于简单超声组。截止表白，简单PpⅨ无开辟L1210细胞凋亡效率，而简单超声和SDT能开辟L1210小鼠白血病细胞凋亡，且后者比前者效率更鲜明。????? 3. 经过激光共聚焦扫描显微镜查看PpⅨ在L1210小鼠白血病细胞中的定位，截止表露PpⅨ和线粒体奇异性标志探针MitoTracker Green有鲜明共定位，表白PpⅨ在L1210细胞中重要定坐落线粒体，提醒线粒体大概在超声贯串PpⅨ开辟L1210小鼠白血病细胞凋亡中起要害效率。????? 4. 流式细胞仪检验和测定创造，SDT处置后L1210小鼠白血病细胞内爆发了洪量活性氧，线粒体膜电位鲜明低沉，DNA片断化水平升高。提醒声能源处置督促的细胞内活性氧爆发，线粒体膜电位低沉，DNA伤害等大概是激励L1210细胞凋亡的要害因为。????? 5. 经过免疫性荧光、western blotting、流式细胞仪等本领检验和测定SDT处置后L1210细胞内关系卵白的亚细胞定位及含量变革，创造凋亡关系卵白Bax转定位至线粒体，细胞色素C开释至胞浆，Caspase-9被剪切活化且Caspase-9活化片断的表白有所升高，Bcl-2的表白量鲜明下调，提醒超声贯串原卟啉Ⅸ开辟L1210小鼠白血病细胞凋亡大概依附于线粒体凋亡通路。

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