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跟着新颖产业的赶快兴盛,洪量化学物资的运用仍旧对野灵巧物的存在情况形成了重要的传染。个中,酚类情况传染物动作情况内渗透干预物重要感化着众生的成长发育并引导众生种群数目低沉。壬基酚(Nonylphenol,NP)即是个中一种情况内渗透干预物,它有着与众生雌荷尔蒙一致的构造,具备弱雌荷尔蒙效力。本试验以雄性华夏林蛙(Rana chensinensis)动作试验众生,商量NP对华夏林蛙肝细胞中的雌荷尔蒙受体(ER)和卵黄卵白原(Vtg)表白的感化,进而深刻领会NP的雌荷尔蒙效力,以及揭穿酚类情况化学传染物感化两栖众生内渗透的体制,并为由NP传染所形成的两栖众生繁衍本领的低沉供给确定的表面按照。本试验将雄性华夏林蛙表露在10-5、10-6、10-7M NP水体中辨别连接10d、20d、30d,以10-8、10-9M 17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)动作阴性比较组;取肝脏构造,用免疫性组化法检验和测定ER和Vtg卵白的表白;用原位杂交法检验和测定ER mRNA的表白;以阴性反馈产品的光密度动作表白对立值。试验截止及论断如次:1、用免疫性组化法检验和测定NP处置后的华夏林蛙肝细胞中Vtg的表白,Vtg阴性反馈重要在细胞质中呈棕黄或黄色。Vtg表白对立值检验和测定截止表白,除10d时10-7M NP处置组的Vtg表白分别不明显(P>0.05),其他各NP处置组中Vtg表白对立值平均高度于比较组,且分别明显(P2、用免疫性组化法检验和测定肝细胞的ER,在各NP处置组和E2阴性比较组均有ER表白,ER阴性反馈在胞质和胞核中呈棕黄或黄色。ER表白对立值检验和测定截止表白,各NP处置组中肝细胞中的ER表白对立值平均高度于空缺比较组,即NP处置组ER的表白量上调;同声NP处置组ER的表白对立值低于E2比较组。在10-5、10-6和10-7 M NP处置组中,到处理功夫的延迟,ER的表白对立值明显升高(P3、用原位杂交检验和测定肝细胞中ER mRNA的表白,在各NP和E2处置组中的肝细胞中均生存ER mRNA阴性反馈,阴性反馈在胞质中呈蓝色。ER mRNA表白对立值检验和测定截止表白,各NP处置组中肝细胞中ER mRNA的表白对立值升高,分别明显;同声ER mRNA的表白对立值低于E2阴性比较组。在10-5、10-6和10-7 M NP处置组中,到处理功夫的延迟,ER mRNA的表白对立值明显升高(P4、从NP处置后肝细胞中ER和Vtg之间的变革趋向领会,NP能开辟ER高调,Vtg的表白量减少,二者的变革趋向也基础普遍。证明ER的合成进程伴跟着Vtg的天生,Vtg的表白依附于ER的程度,NP经过高调ER开辟Vtg的合成。5、本试验中E2动作阴性比较,在沟通处置功夫,NP与E2处置引导ER、Vtg的变革趋向基础普遍,证明NP爆发的效力与E2一致。然而,NP最低处置浓淡比E2最高处置浓淡高级中学一年级个数目级,表白NP的雌荷尔蒙效力低于E2,有较弱的雌荷尔蒙效力。上述截止表白,NP可经过高调肝细胞中ER使Vtg的合成减少,进而表现较弱的雌荷尔蒙效力。
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