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免费论文摘要:绞股蓝总皂苷开辟小鼠白血病L1210细胞凋亡及体制商量

8037 人参与  2022年03月10日 15:59  分类 : 论文摘要  评论

?绞股蓝总皂苷(Gypenoside,Gyp)是笋瓜科植被绞股蓝(?Gyrostemma?pentaphyllum?(Thunb.)?Makino?,GP)的重要活性因素。它具备控制肿瘤、提防单薄、贬低血脂、巩固免疫性、养护心脏和肝脏、贬低血糖、镇停止痛及抗溃疡等药理效率。其体表里接洽截止表白,Gyp具备功夫和剂量依附性的控制多种肿瘤细胞增殖,且开辟细胞凋亡与控制增殖呈正关系。本舆论接洽了Gyp对小鼠白血病细胞株L1210的增殖控制、细胞凋亡及周期妨碍的效率,并对其体制举行了发端商量。接洽截止为国药开拓和肿瘤调节供给了科学表面按照。????本接洽囊括两章,第一章从仍旧创造的全党外培植的小鼠白血病L1210细胞系,接洽Gyp对L1210细胞增殖控制和开辟细胞凋亡效率,对L1210细胞周期妨碍的效率,对细胞DNA伤害效率,对细胞核样式学的变换,对线粒体膜电位、活性氧的爆发、细胞内钙离子的感化;第二章运用自在基废除剂NAC进一步接洽了活性氧对细胞增殖的感化,对细胞周期妨碍和线粒体膜电位的感化,以及Gyp开辟细胞色素C的开释和Bax转定位,开辟线粒体凋亡道路中caspase级联反馈的激活。1.Gyp对L1210细胞增殖控制及凋亡效率????沿用MTT比色法查看Gyp对L1210细胞株增殖的控制效率;沿用流式细胞术检验和测定Gyp对L1210细胞增殖周期的感化;沿用DAPI染色和荧光显微镜本领查看Gyp对细胞核样式学的变换;沿用单细胞凝胶电泳和荧光显微镜本领检验和测定Gyp对细胞DNA伤害的感化;沿用流式细胞术检验和测定Gyp对L1210细胞凋亡效率的感化;运用流式细胞术检验和测定Gyp对L1210细胞线粒体膜电位、活性氧的爆发、胞内钙离子含量的感化。2.Gyp对L1210细胞凋亡效率关系体制的接洽???沿用MTT比色法检验和测定NAC对用药后L1210细胞增殖的感化;沿用流式细胞术,查看NAC对Gyp处置后L1210细胞周期妨碍以及线粒体膜电位变革的感化;沿用转弯抹角免疫性荧光本领和激光共聚焦本领检验和测定Gyp对细胞色素C的开释和Bax转定位的感化;运用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western?blot本领查看Gyp对凋亡实行卵白caspase-9、3表白的感化。重要试验截止如次:1.Gyp控制L1210细胞增殖和开辟细胞凋亡????在全党外培植小鼠白血病L1210细胞,Gyp可明显控制细胞的成长,且呈鲜明的剂量和功夫依附性,药物效率24h后的对折控制浓淡(IC50)为350μg/mL。流式细胞仪领会L1210细胞各组细胞周期的重要展现为S期细胞比率增高,G0/G1期和G2/M期细胞数目缩小,细胞周期妨碍在S期。在荧光显微镜下查看,经DAPI染色后,L1210细胞核染色质固缩和决裂等样式变换,具备功夫依附性。单细胞凝胶电泳查看到Gyp对L1210细胞DNA有伤害,药物效率12h后DNA伤害鲜明;流式细胞术AnnexinV/7-AAD测定创造Gyp开辟细胞凋亡。Gyp可开辟L1210细胞线粒体膜电位低沉,具备功夫依附性;低浓淡Gyp可废除活性氧,高浓淡Gyp开辟活性氧的爆发,呈剂量依附性。Gyp效率细胞后,流式细胞仪检验和测定胞内钙离子浓淡爆发变革,胞内钙离子浓淡随功夫延迟而减少。2.Gyp开辟L1210细胞凋亡关系效率体制????MTT法检验和测定自在基废除剂NAC对立Gyp对L1210细胞的增殖控制;流式细胞仪领会NAC可废除Gyp惹起的L1210细胞周期S期妨碍,以及Gyp开辟L1210细胞凋亡进程中惹起的线粒体膜电位贬低;表白在药物开辟L1210细胞凋亡的进程中启用了要害因子活性氧。运用转弯抹角免疫性荧光法和激光共聚焦显微镜查看到Gyp效率L1210细胞24h后,细胞色素C从线粒体开释到胞质,Bax从细胞质转定位到线粒体。表白Western?blot本领查看到Gyp增高了对卵白caspase-9、3表白程度,并具备功夫依附性。???Gyp控制小鼠白血病L1210成长是经过控制肿瘤细胞增殖、变换细胞周期,经过线粒体道路来开辟肿瘤细胞凋亡等道路来实行的。论断:Gyp对小鼠白血病L1210细胞具备鲜明的抗肿瘤效率,效率体制为Gyp惹起细胞氧化应激,胞内活性氧减少,引导细胞DNA受损,惹起细胞周期妨碍在S期。同声,Gyp开辟爆发的活性氧惹起线粒体伤害,线粒体膜电位低沉,胞内钙离子浓淡升高,Bax卵白转定位至线粒体,引导线粒体膜进一步崩解,细胞色素C开释,惹起卑劣caspase级联反馈,最后以致细胞凋亡。

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