免费论文摘要：RNA干预AtSUS3对拟南芥SUS家属表白形式及角果老练的感化

蔗糖合成酶(Sucrose synthase，EC2.4.1.13，SuSy)由Cardini等1955年在小麦(Triticum aestivum L.)胚芽中初次创造，于今已在45培植物中创造胜过80个SUS基因。该酶为植被蔗糖新陈代谢要害酶之一，可催化：蔗糖+UDP?果糖+UDPG的可逆反馈。细胞中SuSy有两种生存情势，一种是与质膜贯串的不行溶情势(P-SuSy)，一种是生存于细胞质中的可溶情势(S-SuSy)。SuSy在植被的各构造中一致生存，但其活性在库构造中更加高。往常的接洽觉得：SuSy重要介入小粉及纤维素的合成，感化库强，安排蔗糖新陈代谢等，近些年的接洽表白该酶在窘境威吓，健将发育及底栖生物固氮等上面也起着要害效率。SuSy由多基因家属源代码，该家属起码囊括两个基因，拟南芥(Arabidopsis thaliana)中SUS基因家属由六个基因构成：AtSUS1 ，AtSUS2， AtSUS3 ，AtSUS4， AtSUS5 和AtSUS6。已有接洽表白，多基因家属中某一基因的缺点和失误大概会引导其余基因表白巩固来举行积累，AtSUS3在叶片失水、浸透威吓及后熟的健将等百般脱水前提下均有表白，该基因的安静能否感化AtSUS家属中其余基因表白，暂时还不精确。为此咱们建立了RNAi-SUS3干预载体，变化野生型拟南芥，挑选赢得纯系植株后，对转基因植株的表型举行情况扫描电子显微镜、透射电子显微镜查看，同声对木质素含量、酶活性及糖含量等目标举行了检验和测定，并对AtSUS1~ AtSUS6以及糖新陈代谢关系基因的表白量举行领会，其手段旨在领会AtSUS3基因干预后对植株表型及该家属中其余基因表白的感化，以深刻领会该基因家属的功效。本试验截止如次：1、本接洽胜利建立了RNAi-AtSUS3干预载体，变化野生型拟南芥并赢得纯系植株，经分子检验和测定决定干预片断已胜利插入拟南芥中，AtSUS3基因在各转RNAi-AtSUS3拟南芥株系中的表白被控制。2、转基因拟南芥的表型同野生型植株比拟基础普遍。证明AtSUS3基因被干预后，在平常培植前提下对植株表型大概没有鲜明感化。3、转基因拟南芥的角果果瓣内中果皮层细胞木质化水平较之野生型植株要高，且果瓣有明显增厚趋向；经透射电子显微镜查看表露，转基因植株角果内中果皮层细胞的次生细胞壁有增厚局面。4、着花后5天、10天和15天的角果中，SuSy、INV和SPS的活性在朝生型及转基因植株中都是先升高，后贬低。但在这三个阶段的转基因角果中，SuSy的活性都比野生型角果高。着花后5天时，转基因角果和野生型角果中INV的活性无鲜明分别，且此时转基因角果的蔗糖含量低于野生型角果，而果糖含量高于野生型角果，葡萄糖含量与野生型分别不大。而至着花后10天、15天时，转基因角果的INV活性低于野生型角果。5、转基因拟南芥的抽苔早于野生型植株，且优先实行抽苔；转基因植株的角果产率及老练率平均高度于野生型植株。证明AtSUS3基因干预后无助于于转基因植株的发育和角果老练。6、对拟南芥SUS基因家属的六个基因举行RT-PCR表白领会，截止表露AtSUS3在转基因拟南芥角果中的表白被控制，而AtSUS1、AtSUS2、AtSUS4的表白较之野生型明显减少。Real-time PCR的截止与RT-PCR的截止普遍。7、对糖新陈代谢关系基因举行表白领会，截止创造着花后5天时，转基因植株的角果中AtCesA1、AtCesA7和AtCINV1的表白量较之野生型都有所减少；着花后15天时，转基因植株的角果中AtCesA1、AtCesA7的表白量比野生型高，而AtCINV、AtCwINV的表白量比野生型低。

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