论文摘要：紫阳富硒绿茶茶多糖与茶多酚抗肿瘤药理作用研究

紫阳绿茶因富含微量元素硒而出名，在医药领域有“抗癌之王”和“抗衰老明星”的美誉，被营养学界誉为新世纪健康佳品，是极具开发前景的保健产品，尤其是对于补充人体硒的摄入非常有益。
为此，本研究精选生长于特定区域的富硒茶叶—紫阳富硒茶，进而采用本实验室成熟的多糖分离、分析技术，首次成功地将1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化HPLC法（PMP-HPLC-UV）运用于紫阳富硒茶茶多糖中9种单糖的快速分离。研究表明，紫阳富硒茶茶多糖的主要组成单糖为核糖（Rib）、鼠李糖（Rha）、木糖（Xyl）、葡萄糖醛酸（GlcUA）、半乳糖醛酸（GalUA）、甘露糖（Man）、葡萄糖（Glc）、半乳糖（Gal）和阿拉伯糖（Ara），其对应的摩尔百分含量分别为4.3％，1.4％，4.1％，2.6％，3.0％，31.4％，4.6％，21.8％和23.5％。其中主要含Glc、Gal和Ara，摩尔百分含量可达到76.7%。此外，还测得样品糖中糖醛酸含量为16.3%，蛋白质含量为5.1%，硒含量为1.5 μg/g。基于上述实验数据，表明TPS是一种典型的含硒的酸性蛋白杂多糖。同时，采用常规的RP-HPLC分离技术分析茶多酚发现其主要由EGC、CAF、EGCG以及ECG四种成分组成，含量分别为5.7%、42.9%、28.2%和5.6%。
体外抗氧化活性研究结果表明，TPS和TP均具有较强的抗氧化活性，并且呈现出良好的剂量-效应关系。其中TP具有极强的抗氧化活性和还原能力，抗氧化活性显著高于同浓度的阳性药物，而还原能力则接近与同浓度的阳性药物（BHT）。而茶多糖的抗氧化活性则略低于同浓度的阳性药物。总而言之，茶多糖和茶多酚都是有效的天然抗氧化剂，尤其是茶多酚，其抗氧化活性显著高于部分阳性药物。
同时，在已构建的体外肿瘤细胞模型上研究发现，茶多糖和茶多酚对乳腺癌MCF-7细胞、肺腺癌A549细胞以及结肠癌LoVo细胞的生长均有一定的抑制作用，其中对MCF-7细胞的增值抑制的作用最强，LoVo细胞次之，A549最弱。故而本课题只对MCF-7细胞进行深入的机制探讨。通过进一步的研究发现，紫阳富硒茶多糖能够使乳腺癌MCF-7的生长周期阻滞于G2/M期，并且有较明显的促凋亡作用；而茶多酚则将细胞生长周期阻滞于G1期，具有很强的凋亡诱导作用，在0.5 mg/mL时，凋亡率达到37.79%。与此同时，western blot分析发现，茶多糖、茶多酚均可引起Bax和p53蛋白表达上调以及Bcl-2蛋白表达下调。最后试剂盒法分析检测发现，茶多糖和茶多酚均能使caspase-3/9活性升高，而茶多酚的作用较强。基于上述实验结果，可以初步判定茶多糖和茶多酚参与了MCF-7细胞线粒体凋亡途径。
本研究从紫阳富硒绿茶中分离制备含硒茶多糖以及茶多酚，并进行了茶多糖和茶多酚的组成分析以及理化特性研究，在此基础上较为系统的研究了茶多糖和茶多酚的抗肿瘤机制及其剂量-效应关系，为开发自主知识产权的新型食品功能因子或药品提供理论依据，发挥了其巨大的潜在的经济的与社会的效益。

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