免费论文摘要：DEHP对华夏林蛙精巢中StAR、CYP17和CYP19

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexyl phthalate, DEHP)属于邻苯二甲酸酯类复合物(phthalic acid esters, PAEs)，是一种要害的酯类情况雌荷尔蒙，可引导脊椎众生生殖功效低沉，不妨打搅底栖生物肌体内平常的内渗透生殖功效。类固醇荷尔蒙合成慢性安排卵白（steroidogenic acute regulatory protein，StAR）、细胞色素P450c17酶和芬芳化酶（Cytochrome P450 Aromatase，P450arom）在类固醇荷尔蒙合成进程中起要害性安排效率。DEHP能否经过感化两栖众生精巢中StAR、CYP17和CYP19基因的表白而干预类固醇荷尔蒙的合成，暂时未见通讯。本试验将华夏林蛙（Rana chensinensis）雄性成体表露于10-7、10-6、10-5、10-4mol?L-1 DEHP水体20d、30d、40d后，取其精巢，用及时定量PCR对StAR、CYP17和CYP19基因mRNA举行定量领会，用免疫性构造化学本领检验和测定StAR、P450c17和P450arom卵白在精巢中表白。截止如次：1.索取总RNA，用琼脂糖凝胶电泳检验和测定，展示5S、18S、28S三条带，表明RNA样本完备；测定RNA的OD值，获得OD260/OD280比值为1.9，在1.8-2.0之间，表明最后提出的RNA样本适合试验诉求。用RT-PCR本领扩大与增加了273bp的StAR、300bp的CYP17和322bp的CYP19 cDNA序列。并胜利扩大与增加出115bp的β-actin cDNA序列。2.荧光及时定量PCR本领检验和测定StAR mRNA的表白程度截止表露，与比较组比拟，大局部DEHP浓淡组的StAR mRNA表白对立值均极明显增高。比拟各别DEHP浓淡组，在表露20d、30d时，StAR mRNA的表白对立值均跟着DEHP浓淡的增高而贬低，而表露40d时，StAR mRNA表白对立值与DEHP浓淡之间的联系并不顺序。大局部DEHP处置组CYP17 mRNA的表白值与比较组比拟均极明显低沉。CYP17 mRNA表白对立值跟着表露功夫延迟而表露贬低趋向，与DEHP浓淡之间的联系顺序性不强。各DEHP浓淡组的CYP19 mRNA表白对立值与比较组比拟均极明显增高。CYP19 mRNA表白对立值随表露功夫的延迟而变革的顺序性不强，随DEHP浓淡变革的顺序也不鲜明。3.免疫性构造化学检验和测定，StAR、P450c17和P450arom卵白的阴性表白重要生存于Leydig细胞中，而生精致胞和扶助细胞中较少。

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