免费论文摘要：茶树CsAG基因克隆及AG基因体例进化领会

摘 要茶树(Camllia sinensis(L.)O.Kuntze)属茶花科茶花属，是牝牡同株异花授粉的常绿叶用灌木丛或小灌木，为有年生喜温喜湿畏寒植被，是我国要害的木本财经农作物之一。茶树终年的成长由养分成长和生殖成长构成，茶树从昔日花芽分裂发端到翌年果子老练需体验约一年半的功夫，这无疑会篡夺洪量养分物资，对茶树芽叶的成长发育形成不需要的比赛，从而感化茶树鲜叶的产量以及芽叶品德，引导商品酒财经效率低沉。长久此后，为了普及茶树鲜叶的产量和茶叶的养分品德，多沿用有理修剪、符合遮荫、施用氮素比率高的复合肥料，或贯串外源荷尔蒙和成花控制剂的喷施等办法控制生殖成长。但怎样有理调节和控制茶树的生殖成长和养分成长，从基础上普及茶树产量和茶叶品德，是茶树接洽工作家亟待处置的题目。AGAMOUS基因是植被花发育模子中的C类基因，在调节和控制植被花器官分裂和发育中具备要害功效。所以，从茶树中克隆AGAMOUS基因，证明其在转录程度对茶树雄、雌蕊发育的调节和控制体制，并从基因构造和卵白产品的生化个性商量基因功效，将为此后运用底栖生物本领本领遏制茶树的生殖成长供给要害的表面按照。本接洽以陕西场合茶树种质‘紫阳槠叶种’为试验资料，经过变革的SDS酸酚法索取茶树总RNA；沿用RT-PCR和RACE相贯串的本领同源克隆赢得茶树CsAG基因cDNA序列全长；半定量RT-PCR检验和测定CsAG基因在茶树各构造中的表白量，并对茶树CsAG卵白举行构造功效及AG基因体例进化的底栖生物消息学领会。接洽截止如次： 1. 沿用变革的SDS酸酚法索取茶树各别构造总RNA，贯串RT-PCR同源扩大与增加和RACE本领相贯串的本领，克隆获得了茶树AGAMOUS同源基因的CDS，序列全长1263bp，5′ -UTR长度为208 bp，3′-UTR为315bp，源代码观赏框长度为738bp，开始暗号子为ATG，中断暗号子为TAA。同源性比对截止表露，该序列与多培植物AGAMOUS同源基因具备较高同源性，与茶花花AG基因同源性高达90%，故将其定名为茶树CsAG基因 (GenBank 登录号：KJ630566)。 2. 半定量RT-PCR截止表白CsAG基因在分裂实行的茶树花芽的和盛花期的萼片、花瓣、雄蕊、雌蕊以及茶树幼果和芽叶中都有表白，但各构造中的表白水平各别：在雄蕊、雌蕊中表白最强，其次是花芽、萼片及果子，在花瓣中的表白较弱，在芽叶中检验和测定不到CsAG基因的表白，表白CsAG是介入茶树花发育的功效基因。3. CsAG基因的构造功效猜测表露：茶树CsAG基因源代码一个长度为254个氨基酸酸残基的序列，囊括有60个氨基酸酸残基的MADS-box域和100个氨基酸酸残基的K-box域，是典范的MIKC型MADS-box家属基因。猜测卵白质分子式为C1216H1972N370O383S11，对立分子量为28255.9，等电点PI为9.38，不宁静卵白质参数为56.76，为一个亲水性且不宁静的卵白质，盐酸位点猜测表露该卵白有多个盐酸位点，个中色氨酸(Ser)13个，络氨酸(Tyr)位点3个。卵白质的构造猜测截止表露CsAG卵白由α-电钻(100aa, 40.82%)、蔓延链(23aa, 9.03%)和无规弯曲(122aa, 49.80%)形成，具备与其余植被如香烟、葡萄、茶花花等AG卵白一致的三级构造。 4. 对茶树CsAG基因的序列多重比对截止表白：CsAG基因与其它植被AG同源基因都有该基因家属私有的AG motif I和AG motif II两个顽固地区，表白CsAG为MADS-box家属的AG家属分子；建立CsAG基因体例进化树创造，茶树CsAG基因被精确归类到C类基因家属，个中CsAG基因与茶花花的AG1一致性最高，证明茶树CsAG基因与茶花花的亲缘性迩来，其次为野豌豆和八仙花。

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