免费论文摘要：鉴于氧化石墨烯纳米资料的氯过氧化学物理酶恒定化及其运用接洽

摘  要氯过氧化学物理酶（CPO）是从大海真菌Caldariomyces fumago中辨别出来的一种血红素糖卵白酶（42kDa）。与heme-imidazole 血红素过氧化学物理酶各别，CPO属于heme-thiolate 典型的过氧化学物理酶，它兼具细胞色素P-450的单加氧酶活性和过氧化学物理酶活性，而且具备普遍的底物符合性，暂时被觉得是过氧化学物理酶家属中运用最普遍的酶，可催化烯烃环氧化、羟基化、磺化氧化、过氧化以及去卤化等多种典型的反馈。CPO特殊宁静，在4℃时可生存2~3年不失活，运用远景看好。但与其它底栖生物酶一致，CPO在高温、弱酸、强碱、有机溶剂等极其反馈情况中的宁静性较差，且不易从反馈情况中辨别出来举行反复运用，那些都规范了其大范围财产化运用。将酶分子恒定在一种固相载体上是处置这一题目的常用本领。而所采用的载体的本质和恒定化办法对恒定化酶的催化活性有着至关要害的感化。本舆论采用外表容易功效化的氧化石墨烯（GO）为固相载体，按照CPO外表莫大糖基化这一特性，采用-OH为恒定化位点，鉴于凝固素对羟基的奇异性辨别实行CPO在GO 外表的固载。与保守的以氨基酸酸残基上-NH2或-COOH为恒定化位点各别，采用-OH为恒定化位点不妨制止因酶卵白外表氨基酸酸构象的变换而引导的酶活性丢失，展现了本舆论在恒定化战略上的革新。同声，本文华用CPO催化氧化降解三苯乙烷类染料孔雀石绿动作模子反馈参观了恒定化酶的本能，赢得的重要截止如次：(1)本论文华用Hummers法治备GO，经过XRD、UV-vis 、FT-IR、TEM和SEM等对其举行了表征。开始沿用物理吸附法恒定CPO(简称GO-CPO)，鉴于氧化石墨烯具备很大的比外表积和充分的含氧基团，经过氢键、静电效率大概 π-π 键彼此效率实行CPO的固载。同声CPO是一种外表莫大糖基化的卵白酶，所以本舆论还经过凝固素对羟基的奇异性贯串举行CPO恒定(简称GO-ConA-CPO)，这种定向恒定化的本领采用性高，贯串坚韧，能使酶自己维持酶的构象和活性。经过红表面征，表明CPO很好地恒定到了GO上。(2)参观了GO-CPO恒定化前提优化，先经过单成分考查安排得出CPO较有理的固载前提范畴为：pH 2.5~3.5，功夫20~30 min，温度10~20℃。在此普通上，举行了三成分三程度相应曲面法考查，归纳决定了CPO恒定化的最好恒定前提：pH 2.9、功夫26 min、温度13℃，得出CPO的表面固载率54.33%，固载量为250 mg/g。GO-ConA-CPO的最好恒定前提：pH 2.5、功夫90 min、温度30℃，最好固载量为381.32 mg/g，固载功效很好。(3)以孔雀石绿的降解为模子反馈参观的氧化石墨烯恒定化CPO的酶学本能表白：沟通前提下与游离酶比较，恒定化CPO的米氏常数Km均低于游离CPO的，表白酶对底物的亲和性巩固；恒定化酶的Vmax和kcat/Km均大于游离酶的，表白催化反馈速度和对底物的潜心性获得普及； GO-CPO和GO-ConA-CPO的热宁静性、酸碱宁静性、对H2O2浓淡的宁静性和积聚宁静性都鲜明高于游离的CPO，并且GO-ConA-CPO的宁静性强于GO-CPO；GO-CPO反复运用3次此后，染料褪色率为9.87%，而GO-ConA-CPO不妨反复7次此后，染料褪色率为11.23%。

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