免费论文摘要：石榴皮多酚经过PPARγ-ABCA1/CYP7A1通路对肝细胞胆固醇流出感化及其分子体制

本考查以成人平常肝细胞L02为接洽东西，创造肝细胞脂肪变性模子，以石榴皮多酚纯化学物理（PPPs）和其重要因素安石榴苷（PC）以及石榴鞣花酸（PEA）为受试物，沿用RT-PCR检验和测定肝细胞内与胆固醇流出关系基因PPARγ mRNA、ABCA1 mRNA、CYP7A1 mRNA的表白量，进而商量石榴皮多酚经过PPARγ -ABCA1/CYP7A1细胞旗号通路对胆固醇流出的感化及分子体制。其余，运用RNA干预本领，安静肝细胞中PPARγ、LXRα基因表白，创造PPARγ和LXRα基因安静肝细胞株L02-siPPARγ和L02-siLXRα。重要接洽功效如次：(1) 创造肝细胞L02脂肪变性模子：沿用高浓淡血小板建立脂肪变性细胞模子。经过油红O染色查看各组细胞内脂滴变革，用试药盒测定细胞中胆固醇含量及细胞外液中AST和ALT含量。造模培植24h后，细胞内积聚洪量赤色脂滴，TC含量明显减少，培植液AST和ALT含量升高，肝细胞脂变模子创造。(2) 石榴皮多酚对肝细胞内胆固醇含量的感化：各别浓淡的PPPs、PC、PEA均能各别水平地缩小脂肪变性肝细胞L02内的TC含量，功效顺序为：PEA＞PPPs＞PC，沟通浓淡下PEA组降胆固醇功效优于PPPs组和PC组。(3) 石榴皮多酚对PPARγ -ABCA1/CYP7A1细胞旗号通路的感化：PPPs、PC和PEA不妨上调肝细胞中PPARγ 、ABCA1、CYP7A1基因表白量，激活PPARγ -ABCA1/CYP7A1细胞旗号通路，激动胆固醇流出。个中PEA的功效最佳，与临床上运用的降脂药物洛伐他汀逼近，功效由强到弱顺序为：PEA＞PPPs＞PC。(4) 创造PPARγ和LXRα基因安静的L02-siPPARγ和L02-siLXRα细胞系：对准PPARγ、LXRα基因，安排、合成并挑选出不妨灵验控制PPARγ、LXRα基因表白的miRNA，并建立了带有PPARγ、LXRα miRNA的慢宏病毒载体，用包装后的慢宏病毒熏染靶细胞L02，胜利创造相映基因安静细胞株L02-siPPARγ和L02-siLXRα。

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