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酸土环脂芽孢杆菌(Alicyclobacillus acidoterrestris),简称耐热菌,也称之为嗜酸耐热菌,(Thermophilic acidophilic bacteria,TAB)是惹起浓缩苹橘子汁蜕变的重要微底栖生物,因为其耐热耐酸个性,不妨接受碱性橘子汁加工中的巴氏杀菌以芽孢情势而存活,一旦有符合的前提,就可在橘子汁中赶快成长繁衍进而引导橘子汁破坏。所以,耐热菌是浓缩苹橘子汁消费中要害的手段遏制微底栖生物。也是惹起浓缩苹橘子汁蜕变的要害微底栖生物之一。 暂时,对耐热菌的检验和测定,多沿用保守枯燥培植 KFL 计数法。这种本领奢侈功夫长,普遍须要 5-7 天性不妨得出检验和测定汇报。检验和测定截止不许满意消费须要,不许准时检验和测定出橘子汁中能否含有耐热菌以预报产业消费采用提防遏制办法。本试验室初次树立了赶快检验和测定耐热菌的双夹心 ELISA 本领,但多克隆抗机制备办法烦琐,同声抗原效价有待于进一步普及。本接洽经过制备抗酸土环脂芽孢杆菌鼠源单克隆抗原,为本试验室树立的耐热菌 ELISA 本领供给更好的前提扶助。 重要接洽截止如次: (1)本考查开始以酸土环脂芽孢杆菌菌悬液动作免疫性原免疫性 8 周龄雌性 Balb/c小鼠,经 4 次免疫性,抗原效价到达 1:25600。 (2)运用聚乙二醇 PEG 细胞融洽本领,将免疫性脾淋巴液细胞和 SP2/0 骨髓瘤细胞举行融洽,杂交瘤细胞融洽率到达 79%,克隆阴性率到达 37.4%。 (3)将融洽后的细胞运用采用培植基和 ELISA 本领举行挑选,经有限稀释法举行 4 次克隆化培植,胜利的挑选出 3 株杂交瘤细胞株,而且不妨胜利的渗透抗耐热菌抗原,定名为 B5,E9,F11。经检验和测定 3 株细胞培植上清抗原效价辨别为 1:25600,1:51200,1:51200,为高亲和力抗原。
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