免费论文摘要：儿茶酚对K562细胞红系分裂的感化及其大概体制

手段：儿茶酚是要害的产业和制药材料，也是苯在体内的重要新陈代谢产品之一，而苯是罕见的工作妨害成分和室表里情况传染物，不妨惹起人体的血液毒性和骨髓毒性。课题组之前的接洽表白，苯的酚类新陈代谢物（苯酚、氢醌、1,2,4-苯三醇）不妨经过感化K562细胞红系关系基因的甲基化控制K562细胞的红系分裂。但是，发端接洽表白，儿茶酚对K562细胞的红系分裂具备各别于其余苯新陈代谢物的效率。儿茶酚是儿茶酚氧位甲基变化酶（COMT）的底物，该酶可经过耗费甲基供体S-腺苷-L-甲硫氨酸（SAM）和天生甲基变化酶控制剂S-腺苷-L-半胱氨酸（SAH）控制基因的甲基化。本接洽旨在精确儿茶酚对K562细胞红系分裂的感化并商量COMT在个中所起的效率，进而发端接洽儿茶酚对K562细胞红系分裂感化的体制。本领：K562细胞经各别浓淡的儿茶酚，40μM的SAM或SAH处置后，培植48或72h，经氯化高速铁路血红素（Hemin）开辟后，联苯胺染色法检验和测定K562细胞红系分裂情景。介入上述物资培植48或72h后，沿用回转录PCR的本领检验和测定K562细胞红系关系基因α-globin、β-globin、γ-globin、PBGD、ALAS2、GATA-1、NF-E2的mRNA表白程度。索取核基因组DNA后运用定量MassARRAY甲基化检验和测定法检验和测定上述红系关系基因甲基化程度。沿用插入对准COMT基因的siRNA的质粒转染K562细胞，用G418挑选出COMT低表白的K562细胞。经过RNAi安静COMT表白的K562细胞经儿茶酚处置后，运用回转录PCR法检验和测定COMT基因安静后儿茶酚对K562细胞红系关系基因mRNA表白的感化。截止：儿茶酚不妨呈浓淡依附性激动血红卵白和红系关系基因mRNA的合成。独立介入SAM以及独立介入SAH城市激动K562细胞红系分裂，介入儿茶酚后再介入SAM，红系分裂水平较独立介入儿茶酚或SAM升高。经儿茶酚处置后，K562细胞中红系关系基因甲基化水平爆发了确定水平的变革，一切甲基化水平变换具备统计学分别的位点中，除α珠卵白检验和测定地区1的CpG37、38位点外，其他甲基化水平均贬低。RNAi安静COMT基因的表白后，儿茶酚对K562细胞红系关系基因α-globin、β-globin、PBGD的mRNA合成的激动效率消逝。论断：接洽创造儿茶酚不妨激动K562细胞的红系分裂本领，在这个进程中，儿茶酚经过COMT新陈代谢爆发甲基变化酶控制剂SAH控制红系关系基因甲基化，进而激动了K562细胞的红系分裂。

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